慢病毒稳转株构建助力肿瘤转移机制研究

项目背景

某高校肿瘤研究团队聚焦某转录因子在乳腺癌转移中的作用机制，需要构建稳定过表达该基因的细胞株，用于后续迁移与侵袭实验。

技术路线

1. 载体构建：将目标基因 CDS 序列克隆至慢病毒过表达载体（pLVX-IRES-Puro）
2. 病毒包装：293T 细胞包装慢病毒，超速离心浓缩，滴度 ≥ 1×10⁸ TU/mL
3. 细胞感染：感染目标乳腺癌细胞系，嘌呤霉素筛选 2 周
4. 稳转鉴定：Western Blot 与 qPCR 双重验证过表达效率

交付结果

• 过表达效率较空载对照提升 12 倍（qPCR）
• 稳转株传代 5 次后表达水平稳定
• 完整实验报告 + 原始数据 + 稳转细胞株

客户反馈

「维而勤的慢病毒稳转株构建效率很高，从载体到稳转株只用了 3 周，表达稳定性也超出预期，为后续机制研究打下了坚实基础。」