维而勤生物

腺病毒包装

腺病毒包装服务,支持大片段外源基因高效转导,适用于疫苗开发、过表达与溶瘤病毒研究。

腺病毒包装

腺病毒载体(Adenovirus)能够携带大片段外源 DNA、感染分裂细胞和非分裂细胞、诱导体液和细胞免疫应答(这对于疫苗开发是有益的)、表现出高效率的转导和高水平的转基因表达、不整合细胞 DNA(在细胞内保持 dsDNA 游离体形式)。这些特性使其成为基因治疗、疫苗开发和溶瘤病毒疗法的常用载体。

维而勤提供第一代腺病毒(E1/E3 缺失型 Ad5)与嵌合型腺病毒两种包装体系。Ad5 通过病毒颗粒表面纤突(Fiber)与细胞表面 CAR 受体特异性结合介导感染;嵌合型腺病毒改用嵌合纤突与 CD46 分子结合,弥补 Ad5 在低表达 CAR 细胞种类上的转导局限。

订购信息

支持过表达、shRNA 干扰、CRISPR/Cas9、miRNA / lncRNA / circRNA 等多种载体系列。具体价格根据基因长度与载体系列询价。

目录号产品信息规格滴度生产时间
H106干扰腺病毒(单个干扰病毒)1 ml≥1×10¹⁰ PFU/ml25 个工作日
H107干扰腺病毒套餐(3 个干扰病毒 + 1 个阴性对照)4×1 ml≥1×10¹⁰ PFU/ml30 个工作日
H108过表达腺病毒(基因 ≤2000 bp)1 ml≥1×10¹⁰ PFU/ml咨询
H109过表达腺病毒(基因 ≤4000 bp)1 ml≥1×10¹⁰ PFU/ml咨询
H110腺病毒阴性对照1 ml≥1×10¹⁰ PFU/ml10 个工作日
价格根据基因长度与载体系列询价立即询价

服务类型

第一代腺病毒(Ad5)
E1/E3 缺失型,默认推荐
  • 通过纤突(Fiber)与细胞表面 CAR 受体结合介导感染
  • 适用于高表达 CAR 的细胞类型(如 HEK293、HeLa、A549 等)
  • 技术成熟、滴度高、应用最广
嵌合型腺病毒
CD46 介导,拓宽感染谱
  • 改用嵌合纤突与 CD46 分子结合
  • 弥补 Ad5 在低表达 CAR 细胞(如原代细胞、树突状细胞、部分肿瘤细胞)的转导局限
  • 适用于 CAR 低表达的难感染细胞类型

交付内容

定制病毒交付规格(修正 anzhenbio 表头笔误,本表为腺病毒数据)

项目非纯化腺病毒制备纯化腺病毒制备
定制病毒交付小量:≥1×10¹⁰ IFU/ml,10×25 μl 中量:≥1×10¹⁰ IFU/ml,10×100 μl 大量:≥1×10¹¹ IFU/ml,10×100 μl大量:≥1×10¹² VP/ml,10×100 μl
对照病毒小量:100 μl(赠送) 中/大量:2×100 μl(赠送)大量:10×100 μl(选购)
辅助病毒对应规格(选购)大量:10×100 μl(选购)
Polybrene 聚凝胺5 mg/ml,200 μl(赠送)5 mg/ml,200 μl(赠送)
病毒重悬液腺病毒专用储存液GTS 缓冲液
推荐应用体外培养细胞转导动物体内细胞转导

以上为参考交付范围,具体交付内容以双方确认的实验方案为准,详情请咨询技术支持。

对照病毒

选择原则:对照病毒的荧光标签 / 启动子应与定制病毒一致;干扰实验对照需匹配干扰载体类型。

对照病毒载体名称载体 ID适用定制病毒提供方式
EGFP 对照腺病毒(CMV 启动子)pAV[Exp]-CMV>EGFPVB010000-9299hac过表达 / CRISPR / 非编码 RNA赠送
Scramble shRNA 对照腺病毒(EGFP 荧光)pAV[shRNA]-EGFP-U6>ScrambleVB010000-9300kfrshRNA 干扰赠送
Scramble miR30-shRNA 对照腺病毒(EGFP 荧光)pAV[miR30]-CMV>EGFP:ScrambleVB010000-9350dnkmiR30-shRNA 干扰赠送
EGFP 对照腺病毒(EF1A 启动子)pAV[Exp]-EF1A>EGFPVB900088-2235wrm过表达(EF1A 启动子)选购
mCherry 对照腺病毒(CMV 启动子)pAV[Exp]-CMV>mCherryVB010000-9300kfr过表达(红色荧光)选购
FLEX-EGFP 对照腺病毒pAV[FLEX_on]-CMV>rev(EGFP)VB010000-9327vmyFLEX 条件性表达选购

辅助病毒

辅助病毒需配合特定系统使用,按需选购。

辅助病毒载体名称载体 ID适用场景提供方式
Cas9 腺病毒pAV[Exp]-CMV>hCas9VB180820-1032mbq配合仅表达 gRNA 的腺病毒做 CRISPR 编辑选购
Cre 腺病毒pAV[Exp]-CMV>CreVB180308-1398jmt配合 FLEX 条件性表达腺病毒激活靶基因选购

运输 / 储存

病毒对温度敏感,请严格按以下条件保存,避免滴度下降。

🧊
长期保存
-80℃
干冰运输,收到后立即转入。保存约 1 年。
❄️
短期保存
-20℃
保存 2-3 周,适合近期使用。
💧
融解后
4℃
保存 1-2 周,避免反复冻融。

生产 / 质控

维而勤每批病毒出厂前均经过以下质控(anzhenbio 此项空白,我们补全):

无菌检测
方法:微生物培养法
标准:符合无菌要求
内毒素检测
方法:LAL 鲎试剂法
标准:体内级 < 10 EU/ml
支原体检测
方法:PCR 法
标准:阴性
滴度测定
方法:TCID50 法(感染滴度 IFU/ml)+ OD260 法(物理滴度 VP/ml)
标准:达标后交付
纯度检测
方法:SDS-PAGE 凝胶电泳
标准:无杂蛋白污染

滴度保证

最大承载容量
38.7 kb
约野生型 HAd5 基因组(36 kb)的 108%。从 5' ITR 到 3' ITR 之间的包装区域长度超出此限的序列,在包入衣壳时可能会被截断。
⚠️以下情形不保证滴度
  • 含毒性基因(促凋亡基因)
  • 破坏包装细胞或病毒完整性的基因(致细胞聚集的膜蛋白)
  • 易重排或形成二级结构的序列(重复序列、高 GC 含量)
  • 客户提供载体(无法控制质量)

交付周期

标准交付周期
25-30 个工作日
从确认目的基因序列与载体方案次日起算;纯化方案、滴度要求、订单高峰期可能延长,以合同为准。

客户提供载体

如客户已有穿梭质粒,可直接提供载体由我们完成包装。提供前请确认以下事项:

  • 载体类型为腺病毒穿梭质粒(如 pShuttle、pAdTrack 等)
  • 目的基因序列已完成测序验证,无突变
  • 提供载体图谱与抗性信息
  • 提供足量质粒(≥ 5 μg,浓度 ≥ 100 ng/μl)
  • 若载体含特殊元件(如 FLEX、Cre-lox),提前说明
客户提供载体的包装项目不纳入滴度保证范围(见滴度保证章节第 4 条)。
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本页内容为一般性介绍,实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准,详情请咨询技术支持。