维而勤生物

慢病毒包装

慢病毒包装服务,支持稳转细胞株构建与体内基因递送,转导分裂与非分裂细胞。

慢病毒包装

慢病毒载体(Lentivirus vectors)的特性:在非分裂和分裂细胞中稳定整合、转基因的长期表达、低免疫原性,使其成为基因治疗的理想基因转移载体。转基因可以在非分裂或终末分化的极静止细胞(例如神经元)中实现稳定表达,这是常规逆转录病毒载体无法做到的。

维而勤的慢病毒载体来源于 HIV-1 病毒,序列经过精心优化,提高了生物安全性、基因表达水平和病毒转导效率。慢病毒颗粒通常是在包装细胞中共表达病毒体包装元件和载体基因组来产生的。我们开发出一系列专有技术和试剂,从病毒滴度、纯度、活性以及一致性等方面提升了慢病毒包装工艺水平。

订购信息

支持过表达、shRNA 干扰、CRISPR/Cas9、miRNA / lncRNA / circRNA 等多种载体系列。具体价格根据基因长度与载体系列询价。

目录号产品信息规格滴度生产时间
H101干扰慢病毒(单个干扰病毒)1 ml≥1×10⁸ TU/ml15 个工作日
H102干扰慢病毒套餐(3 个干扰病毒 + 1 个阴性对照)4×1 ml≥1×10⁸ TU/ml20 个工作日
H103过表达慢病毒(基因 ≤2000 bp)1 ml≥1×10⁸ TU/ml咨询
H104过表达慢病毒(基因 ≤4000 bp)1 ml≥1×10⁸ TU/ml咨询
H105慢病毒阴性对照1 ml≥1×10⁸ TU/ml10 个工作日
价格根据基因长度与载体系列询价立即询价

病毒类型

第三代慢病毒(默认)
VSV-G 假病毒化,生物安全性最高
  • 默认推荐配置,自失活(SIN)设计
  • 去除 HIV 辅助蛋白,生物安全性最高
  • 适用于绝大多数体外/体内基因递送场景
第二代慢病毒
VSV-G 假病毒化
  • 保留部分辅助蛋白,滴度略高
  • 适用于对滴度要求极高的特定实验
其他膜蛋白假病毒化
可定制,拓宽感染嗜性
  • 替换 VSV-G 为其他膜蛋白(如冠状病毒刺突蛋白)
  • 改造感染嗜性,用于研究病毒入侵机制
表面光秃慢病毒
无膜蛋白,阴性对照用
  • 无膜蛋白的裸露慢病毒颗粒
  • 用于转导实验的阴性对照,排除非特异性影响

交付内容

按非纯化 / 纯化两种制备服务对照交付物

项目非纯化慢病毒制备纯化慢病毒制备
定制病毒交付小量:≥1×10⁸ TU/ml,10×25 μl 中量:≥1×10⁸ TU/ml,10×100 μl 大量:≥1×10⁹ TU/ml,10×100 μl中量:≥1×10⁹ TU/ml,10×50 μl 大量:≥1×10⁹ TU/ml,10×100 μl
对照病毒小量:100 μl(赠送) 中/大量:2×100 μl(赠送)中/大量:按规格选购
辅助病毒对应规格(选购)中/大量:按规格选购
Polybrene 聚凝胺5 mg/ml,200 μl(赠送)5 mg/ml,200 μl(赠送)
病毒重悬液慢病毒专用储存液慢病毒专用储存液
运输/存储干冰 / -80℃,避免反复冻融干冰 / -80℃,避免反复冻融
推荐应用体外培养细胞转导体外培养细胞转导、动物体内细胞转导

以上为参考交付范围,具体交付内容以双方确认的实验方案为准,详情请咨询技术支持。

对照病毒

选择原则:对照病毒与定制病毒的生物学应用相匹配。定制病毒表达基因 → 对照用 EGFP;定制病毒表达 shRNA → 对照用 Scramble shRNA。

对照病毒载体名称载体 ID适用定制病毒提供方式
EGFP 对照慢病毒(EGFP/mCherry 双荧光,Puro 抗性)pLV[Exp]-EGFP:T2A:Puro-EF1A>mCherryVB010000-9298rtf过表达 / CRISPR / 非编码 RNA赠送
Scramble shRNA 对照慢病毒(EGFP 荧光,Puro 抗性)pLV[shRNA]-EGFP/Puro-U6>Scramble_shRNAVB010000-0009mxcshRNA 干扰赠送
Scramble miR30-shRNA 对照慢病毒(EGFP/mCherry 双荧光,Puro 抗性)pLV[miR30]-EGFP/Puro-EF1A>mCherry:Scramble_miR30-shRNAVB010000-9387zjjmiR30-shRNA 干扰赠送
Scramble msgRNA 对照慢病毒(EGFP 荧光,Puro 抗性)pLV[msgRNA]-EGFP/Puro-U6>Scramble_gRNAVB010000-9298rtfmsgRNA(dCas9-SAM 系统元件)赠送
TRE-mCherry 对照慢病毒(EGFP/mCherry 双荧光,Puro 抗性)pLV[TetOn]-EGFP/Puro-TRE>mCherryVB180820-1492jrbTet-On 诱导表达选购
FLEX-mCherry 对照慢病毒(EGFP/mCherry 双荧光,Puro 抗性)pLV[FLEXon]-EGFP/Puro-EF1A>LL:rev(mCherry):rev(LL)VB010000-9324qqgFLEX 条件性表达选购

辅助病毒

辅助病毒与定制病毒的生物学应用相匹配。定制是仅含 TRE 的 TetOn 慢病毒 → 需表达 rtTA 的辅助病毒才能诱导表达。

辅助病毒载体名称载体 ID适用定制病毒提供方式
Cas9 慢病毒(Hygro 抗性)pLV[Exp]-CBh>hCas9/HygroVB010000-9380sne仅含 gRNA 的慢病毒(CRISPR 编辑)选购
MS2/P65/HSF1 慢病毒(dCas9-SAM 元件,Hygro 抗性)pLV[Exp]-EF1A>MS2/P65/HSF1/HygroVB010000-9383ffrmsgRNA 慢病毒(dCas9-SAM 系统)选购
dCas9/VP64 慢病毒(dCas9-SAM 元件,Bsd 抗性)pLV[Exp]-EF1A>dCas9/VP64/BsdVB010000-9384wwcmsgRNA 慢病毒(dCas9-SAM 系统)选购
Cre 慢病毒(Hygro 抗性)pLV[Exp]-CMV>Cre/HygroVB010000-9372bckFLEX 条件性表达选购
tTS/rtTA 慢病毒(Hygro 抗性)pLV[Exp]-CMV>tTS/rtTA/HygroVB010000-9369xhmTet-On 诱导表达 TRE 慢病毒选购

运输 / 储存

慢病毒存储于专用储存液中,全程干冰运输。收到后立即放置于 -80℃。

🧊
运输方式
干冰运输
病毒存储于慢病毒专用储存液,全程干冰运输
❄️
长期保存
-80℃
收到后立即放置于 -80℃,长期贮存至少 6 个月,保质期约 1 年
💧
使用注意
避免反复冻融
反复冻融会导致慢病毒滴度大幅下降

生产 / 质控

维而勤每批慢病毒出厂前均经过以下质控(anzhenbio 此项空白,我们补全):

无菌检测
方法:微生物培养法
标准:符合无菌要求
内毒素检测
方法:LAL 鲎试剂法
标准:纯化级 < 5 EU/ml
支原体检测
方法:PCR 法
标准:阴性
滴度测定
方法:荧光计数法(含报告基因)/ qPCR 法
标准:达标后交付(TU/ml)
纯度检测
方法:p24 ELISA / SDS-PAGE
标准:无杂蛋白污染

滴度保证

最大承载容量
9.2 kb
约野生型 HIV-1 基因组长度。载体上的慢病毒基因组(从 5′ LTR 的 R 元件第一个碱基到 3′ LTR 的 R 元件最后一个碱基)长度须小于 9.2 kb;超出范围病毒基因组也许会被包装,但会造成滴度降低。
⚠️以下情形不保证滴度
  • 含毒性基因(促凋亡基因、针对 HIV 的 host factors)
  • 破坏包装细胞完整性的基因(致细胞聚集的膜蛋白)
  • 破坏慢病毒 RNA 基因组完整性的序列(含 polyA 信号序列)
  • 易重排或形成二级结构的序列(重复序列、高 GC 含量)
  • 客户提供载体(无法控制质量)

交付周期

标准交付周期
10-20 个工作日
H105 阴性对照 10 个工作日 / H101 单干扰 15 个工作日 / H102 干扰套餐 20 个工作日;H103/H104 过表达需咨询。不含荧光但含药筛标记的病毒,若需细胞药筛质检,周期额外增加 15-20 天。

客户提供载体

如需客户提供慢病毒载体,请按外来物品接收指南寄送,严格按要求装运以免延误和损坏。

  • 按外来物品接收指南寄送载体
  • 严格按指南装运,避免延误和损坏
  • 所有材料均需经过 QC 检测,每份材料附加检测费用
  • 客户提供物品接收并通过 QC 之后生产才正式开始
客户提供物品接收并通过 QC 之后生产才正式开始;每一份材料附加检测费用。
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本页内容为一般性介绍,实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准,详情请咨询技术支持。