流式细胞分析
流式细胞分析服务（免疫表型/细胞亚群/周期/凋亡）。
流式细胞分析
流式细胞术（Flow Cytometry）能对单个细胞进行多参数快速定量分析，广泛应用于免疫表型分型（CD 标记）、细胞亚群比例、细胞周期、细胞凋亡、细胞因子分泌等检测，是免疫学与细胞学研究的核心平台。通过多色荧光抗体配色与设门策略，可精确量化目标细胞群体，是肿瘤免疫、药物免疫毒性、疫苗评价的关键技术。
维而勤提供多色（4-6 色）流式细胞分析服务，支持小鼠与人源样本（外周血、脾脏、淋巴结、肿瘤组织等），配套荧光补偿调节、标准化设门策略（FSC/SSC → CD45 → CD3 → CD4/CD8）与 FlowJo 专业数据分析，采集 1×10⁴-1×10⁵ events 确保统计学可靠性，所有实验须经 IACUC 伦理审查，遵循 3R 原则与 GB/T 35892 国家标准。
订购信息
按检测项目与配色组合定制，按样本数与色数询价。
| 目录号 | 检测项目 | 典型抗体组合 | 样本类型 | 备注 |
|---|---|---|---|---|
| AM1701 | 免疫表型分型 | CD3 / CD4 / CD8 / CD45 / CD45R(B220) / NK1.1 | 脾脏/血液/淋巴结 | T/B/NK 细胞亚群比例 |
| AM1702 | 细胞周期分析 | PI（碘化丙啶）单染 | 培养细胞 | G1/S/G2-M 比例，ModFit 拟合 |
| AM1703 | 细胞凋亡检测 | Annexin V-FITC / PI 双染 | 培养细胞 | 早晚期凋亡与坏死比例 |
| AM1704 | 细胞因子分泌（胞内） | IFN-γ / TNF-α / IL-2 + PMA/Iono 刺激 | 脾细胞/ PBMC | 需 BFA/Monensin 阻断，固定破膜 |
| AM1705 | 肿瘤浸润淋巴细胞（TIL） | CD45 / CD3 / CD8 / CD4 / PD-1 / Tim-3 | 肿瘤组织 | 解离后流式，评价肿瘤免疫微环境 |
价格根据检测项目、色数、样本数与抗体来源（自备/代购）询价立即询价 →
检测方向对比
免疫表型分型
T/B/NK/髓系亚群定量
- 设门策略：FSC/SSC → CD45⁺ → CD3⁺ → CD4⁺/CD8⁺
- B 细胞（CD45R/B220）、NK（NK1.1）、巨噬/髓系（CD11b/F4/80）
- 可扩展到 6-8 色配色，含活化/耗竭标志（CD69/PD-1/Tim-3）
- 适合免疫毒性、疫苗、肿瘤免疫评价
细胞周期
DNA 含量分析增殖
- PI 染色测 DNA 含量，70% 乙醇固定
- RNase 消化去 RNA 干扰
- ModFit LT 拟合 G1/S/G2-M 比例
- 增殖指数（PI = S+G2M/总数）评价增殖活性
细胞凋亡
Annexin V/PI 区分阶段
- Annexin V-FITC 检测磷脂酰丝氨酸外翻
- PI 区分早期（Annexin V⁺PI⁻）与晚期（双阳性）
- 可设 Staurosporine/UV 阳性对照
- 适合药物毒性机制研究
TIL 与免疫微环境
肿瘤浸润淋巴细胞分析
- 肿瘤组织酶解/机械解离制备单细胞悬液
- CD45 圈出浸润免疫细胞 → CD3/CD8/PD-1 分型
- 评价抗肿瘤免疫与免疫检查点抑制剂药效
- 需活细胞占比 ≥ 70%，死活染料（如 Zombie）排除死细胞
交付内容
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| 原始数据 | FCS 格式原始流式数据 |
| 设门图 | 逐级设门策略图（FSC/SSC → 标志物 → 亚群） |
| 定量数据 | 各亚群百分比/绝对计数、MFI（平均荧光强度） |
| 统计分析 | 组间 t 检验/ANOVA，p 值与显著性 |
| 报告 | 流式分析报告（PDF，含 IACUC 编号、配色、图表） |
以上为参考交付范围，具体交付内容以双方确认的实验方案为准，详情请咨询技术支持。
质控标准
流式分析遵循以下质控规范，确保数据可靠可重复：
✓events 采集
方法：每样本采集目标群 ≥ 1×10⁴-1×10⁵ events
标准：稀有亚群至少 100-500 events 保证统计可靠
✓荧光补偿
方法：单染对照调节补偿矩阵
标准：多色配色荧光串色 ≤ 5%
✓死活排除
方法：死活染料（PI/7-AAD/Zombie）排除死细胞
标准：活细胞占比 ≥ 70%，避免死细胞非特异结合
✓FMO 对照
方法：荧光减一对照（Fluorescence Minus One）
标准：准确界定阳性群体边界
✓动物福利
方法：IACUC 审查 + 样本制备规范
标准：符合 3R 原则与 GB/T 35892，组织解离与采血规范
技术参数
关键参数
4-6 色 / 1×10⁴-1×10⁵ events
多色配色 4-6 色（可扩展到 8 色）；采集目标群 1×10⁴-1×10⁵ events；样本类型涵盖外周血、脾脏、淋巴结、肿瘤组织、培养细胞。 流式结果受样本制备（活细胞比例、红细胞残留）、抗体效价、荧光补偿、设门策略影响显著；肿瘤组织解离后活细胞比例与酶解条件直接相关，建议在维而勤统一制备与分析。
⚠️以下情形可能影响结果
- •样本运输或保存不当导致细胞活性下降，影响染色
- •红细胞残留干扰淋巴细胞设门（需充分裂解）
- •自备抗体效价不足或种属不匹配影响染色效果
- •罕见亚群（< 1%）需采集更多 events 才能可靠定量
客户提供材料要求
委托维而勤前请按以下清单准备材料：
- ✓明确检测项目（表型/周期/凋亡/细胞因子/TIL）与目标细胞群
- ✓明确样本类型（培养细胞/外周血/脾脏/淋巴结/肿瘤组织）与数量
- ✓提供抗体信息（货号、克隆号、荧光通道、种属反应性），可由维而勤代购
- ✓明确配色方案或交由维而勤设计
- ✓培养细胞请提供培养条件与细胞量（≥ 1×10⁶/样本）
- ✓提供 IACUC 伦理批件编号（动物组织样本）
流式结果的可靠性高度依赖样本质量（细胞活率）与配色设计；建议新鲜制备样本当日上机，自备抗体需提供验证数据。
交付周期
标准交付周期
5-7 个工作日（样本到达后制备、染色、上机、分析）
从样本到达与方案确认次日起算；复杂配色或多色 TIL 方案可能延长，以合同为准。
本页内容为一般性介绍，实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准，详情请咨询技术支持。