基因修饰模型
基因修饰动物模型服务（转基因/敲除/条件性敲除）。
基因修饰动物模型
基因修饰动物模型（Genetically Modified Model）是通过基因工程手段在动物基因组上定向改造建立的模型，能精确模拟人类疾病基因突变，是基因功能研究与精准疾病模型的金标准。常用技术包括 CRISPR/Cas9 原核显微注射、ES 细胞同源重组打靶、受精卵转基因注射等，可构建全身性敲除（KO）、条件性敲除（floxed + Cre）、敲入（KI）、转基因（TG）等多种类型模型。
维而勤提供从模型策略设计、sgRNA/打靶载体构建、受精卵显微注射/ES 打靶、代孕母鼠移植、F0 基因型鉴定到 F1/F2 繁育建系的全流程基因修饰小鼠/大鼠定制服务，配套基因型鉴定（PCR + Sanger 测序）与表型初筛，所有繁育均在 SPF 级设施内按 IACUC 伦理规范开展，符合 3R 原则与 GB/T 35892 国家标准。
订购信息
按修饰类型与技术路线定制，按项目复杂度询价。
| 目录号 | 修饰类型 | 技术路线 | 周期 | 备注 |
|---|---|---|---|---|
| AM1201 | 全身性敲除（KO） | CRISPR/Cas9 显微注射 | 4-6 个月 | 移码突变或大片段删除，NHEJ 介导 |
| AM1202 | 条件性敲除（cKO） | CRISPR + 同源重组（flox + Cre） | 6-9 个月 | 两侧 loxP 位点，需配套 Cre 工具鼠 |
| AM1203 | 敲入（KI） | CRISPR + HDR 供体模板 | 6-9 个月 | 精确插入点突变/标签/荧光报告基因 |
| AM1204 | 转基因（TG） | 受精卵原核显微注射 | 4-6 个月 | 过表达/组织特异性表达，随机整合 |
| AM1205 | ES 细胞打靶复杂模型 | ES 同源重组 + 囊胚注射 | 8-12 个月 | 大片段替换/人源化，复杂修饰首选 |
价格根据修饰类型、片段大小、技术路线与繁育规模询价立即询价 →
修饰类型对比
全身性敲除（KO）
全程失活，研究基因基本功能
- 技术：CRISPR/Cas9 + NHEJ 移码突变或大片段删除
- F0 嵌合体 → F1 杂合子互交 → F2 纯合子建系
- 周期短（4-6 个月），适合非致死基因
- 局限：胚胎致死基因无法获得纯合成年鼠
条件性敲除（cKO）
时空特异性敲除，解决胚胎致死
- 构建 flox 小鼠（关键外显子两侧 loxP）
- 与组织/时期特异性 Cre 工具鼠交配实现敲除
- 可 inducible（如 Cre-ERT2）实现诱导型敲除
- 周期 6-9 个月，适合成体致死或组织特异性研究
敲入（KI）
精确修饰，模拟人类点突变
- 技术：CRISPR/Cas9 + HDR 同源重组供体模板
- 可敲入点突变、荧光标签（GFP/Flag/Myc）、人源化序列
- 保留内源调控，表达水平生理
- HDR 效率低于 NHEJ，需筛选，周期 6-9 个月
转基因（TG）
过表达/外源基因，随机整合
- 技术：受精卵原核显微注射线性化 DNA 片段
- 可选用组织特异性启动子（如 Alb-Cre 肝脏、CamKIIa 神经）
- 拷贝数与整合位点随机，需筛选稳定表达系
- 周期 4-6 个月，适合 gain-of-function 与报告基因研究
交付内容
| 项目 | 内容 |
|---|---|
| F0 Founder 鼠 | 显微注射/打靶后出生的首代鼠（含基因型鉴定） |
| F1 杂合子 | F0 与野生型交配获得的 F1 代（确认种系传递） |
| 建系 | F1 杂合子互交获得 F2 纯合子（KO/KI）或 flox 纯合子（cKO） |
| 基因型鉴定 | PCR + Sanger 测序报告，附引物序列与图谱 |
| 繁育档案 | 系谱图、交配记录、基因型鉴定记录 |
| 报告 | 模型构建报告（含策略、sgRNA/载体序列、鉴定结果） |
以上为参考交付范围，具体交付内容以双方确认的实验方案为准，详情请咨询技术支持。
质控标准
基因修饰模型构建遵循以下质控规范，确保基因型准确与种系传递：
✓sgRNA/载体验证
方法：体外切割活性测试 + 测序确认
标准：脱靶预测筛选，效率 ≥ 50%
✓F0 基因型鉴定
方法：PCR + Sanger 测序（双引物覆盖靶位点）
标准：确认等位基因修饰类型（移码/缺失/插入/重组）
✓种系传递
方法：F0 × 野生型 → F1 基因型鉴定
标准：F1 杂合子阳性率 ≥ 50% 确认种系传递
✓脱靶检测
方法：预测潜在脱靶位点 PCR + 测序（可选 T7E1/NGS）
标准：主要脱靶位点无突变（可选服务）
✓动物福利
方法：IACUC 审查 + SPF 级繁育
标准：符合 3R 原则与 GB/T 35892 国家标准
技术参数
关键参数
周期 4-12 个月（视修饰类型）
CRISPR KO/TG 4-6 个月；cKO/KI 6-9 个月；ES 打靶 8-12 个月。 F0 嵌合体比例、HDR 效率、胚胎致死等因素显著影响建系成功率；复杂修饰（大片段敲入、人源化）建议预留更多 Founder 与繁育周期。
⚠️以下情形可能影响结果
- •胚胎致死基因无法获得纯合成年鼠，需改用条件性敲除策略
- •CRISPR 可能存在脱靶，重要模型建议做脱靶位点验证
- •转基因随机整合，表达水平与拷贝数不可控，需多系筛选
- •复杂修饰（如大片段人源化）HDR 效率低，周期延长
客户提供材料要求
委托维而勤前请按以下清单准备材料：
- ✓明确目的基因（基因符号、NCBI/Ensembl ID）、种属（小鼠/大鼠）与修饰类型（KO/cKO/KI/TG）
- ✓提供靶基因序列/转录本信息与期望修饰位置（外显子编号、氨基酸位点）
- ✓KI/TG 需提供敲入序列/表达元件（启动子、标签、报告基因）
- ✓cKO 需指定 Cre 工具鼠品系（如 Alb-Cre、Nestin-Cre、Cre-ERT2）或由维而勤配套
- ✓明确交付形式：F0、F1 杂合子或纯合建系
- ✓提供 IACUC 伦理批件编号（可由维而勤协助申请）
基因修饰模型构建涉及活体动物与基因操作，须经 IACUC 伦理审查；复杂模型建议预留 8-12 个月周期与冗余 Founder 数。
交付周期
标准交付周期
4-12 个月（视修饰类型）
CRISPR KO/TG 4-6 个月；cKO/KI 6-9 个月；ES 打靶 8-12 个月。 从方案确认与显微注射次日起算；胚胎致死或繁育困难模型可能延长，以合同为准。
本页内容为一般性介绍，实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准，详情请咨询技术支持。