细胞周期
细胞周期检测服务(PI 流式分析)。
细胞周期检测
细胞周期(Cell Cycle)是细胞增殖的核心过程,分为 G0/G1、S、G2/M 几个阶段。通过碘化丙啶(PI)嵌入双链 DNA 后用流式细胞仪检测荧光强度,可基于 DNA 含量(G1 期为 2N,G2/M 期为 4N,S 期介于两者之间)分析各时相细胞比例,是评估细胞增殖状态、药物周期阻断作用、肿瘤生物学特性的重要手段。
维而勤提供 PI 染色流式细胞周期分析服务,配套 70% 乙醇固定、RNase A 消化(去除 RNA 干扰,PI 也能结合 RNA)、PI 染色(50 μg/mL)与 ModFit LT 拟合软件,可精确给出 G0/G1、S、G2/M 各时相比例与增殖指数(PI = (S+G2/M)/(G1+S+G2/M)),并支持血清饥饿、诺考达唑、胸苷双阻断等周期同步化方案。
订购信息
支持 PI 染色流式周期分析与周期同步化方案设计,可设药物干预组。
| 目录号 | 服务项目 | 检测内容 | 分析指标 | 生产时间 |
|---|---|---|---|---|
| CX801 | 细胞周期检测(单组单样本) | PI 染色 + 流式 | G1/S/G2-M 比例 | 5-7 个工作日 |
| CX802 | 细胞周期检测(多组比较) | PI 染色 + 流式 | 各时相比例 + 增殖指数 | 6-8 个工作日 |
| CX803 | 周期同步化方案设计 | 血清饥饿 / 诺考达唑 / 胸苷 | 同步化效率评估 | 咨询 |
| CX804 | 细胞周期 + 凋亡联检 | PI 周期 + Annexin V/PI | 周期 + 凋亡双指标 | 咨询 |
| CX805 | 药物周期阻断分析(多浓度) | PI 染色 + 流式 | 剂量-效应周期分布 | 7-10 个工作日 |
价格根据样本量与分组数询价立即询价 →
交付内容
交付 DNA 含量直方图、各时相比例与增殖指数,支持 ModFit 拟合报告。
| 交付项目 | 内容说明 |
|---|---|
| DNA 含量直方图 | PI 荧光强度分布图(流式原始 + ModFit 拟合) |
| 各时相比例 | G0/G1、S、G2/M 各时相细胞百分比统计表 |
| 增殖指数 | PI = (S+G2/M)/(G1+S+G2/M) 计算结果 |
| 拟合报告 | ModFit LT 拟合报告(含 Goodness of Fit RCS 值) |
| 实验报告 | PDF 报告(含固定染色流程、上机参数与结论) |
以上为参考交付范围,具体交付内容以双方确认的实验方案为准,详情请咨询技术支持。
质控标准
PI 染色流式周期检测全流程质控:
✓细胞量
方法:细胞计数(固定前)
标准:每样本 ≥ 1×10⁶ cells
✓固定
方法:70% 预冷乙醇,4℃ 固定 ≥ 2 h
标准:固定充分,可过夜(不超过 2 周)
✓RNase 消化
方法:RNase A 50 μg/mL,37℃ 30 min
标准:充分消化 RNA,避免 S 期假阳性
✓PI 染色
方法:PI 50 μg/mL,4℃ 避光 30 min
标准:避光孵育,染色均匀
✓上机采集
方法:低速采集 ≥ 1×10⁴ cells
标准:CV(变异系数)< 5%
✓拟合质量
方法:ModFit LT 软件拟合
标准:Goodness of Fit (RCS) 理想 < 5
技术参数
关键参数
PI 50 μg/mL / RNase 50 μg/mL
PI 终浓度 50 μg/mL 结合双链 DNA,RNase A 50 μg/mL 37℃ 30 min 消化 RNA 干扰。每样本上机采集 ≥ 1×10⁴ cells,CV(变异系数)< 5%,ModFit LT 拟合 RCS < 5 时数据可信。
⚠️以下情形可能影响结果
- •组织样本或贴壁极紧的细胞消化时可能产生团聚或碎裂,影响直方图峰形
- •样本中混杂亚二倍体峰(sub-G1)可能提示凋亡,需结合凋亡检测判定
- •细胞倍增过快或同步化不佳会导致 S 期比例不稳定
- •固定时间过长(> 2 周)导致 PI 染色减弱、CV 升高
- •客户提供样本固定不当或运输导致细胞降解
客户提供
委托维而勤前请按以下清单准备材料:
- ✓提供待测细胞株名称、来源、代次与培养条件
- ✓明确药物处理方案:药物名称、浓度、处理时间与检测时间点
- ✓明确是否需要周期同步化(血清饥饿 / 诺考达唑 / 胸苷双阻断)
- ✓明确分组与重复数(常规 3 复孔/组)
- ✓如检测原代细胞或悬浮细胞,需提前沟通固定与染色方案
- ✓如客户自备药物,需提供溶解度、溶剂与活性信息
PI 染色必须配合 RNase A 消化,否则 RNA 会与 PI 结合导致 S 期假阳性升高;固定后样本应尽快上机,避免长期储存导致 CV 升高;亚二倍体峰(sub-G1)出现提示凋亡,建议联检 Annexin V/PI。
交付周期
标准交付周期
5-7 个工作日
从确认方案与收到合格细胞次日起算;含周期同步化方案或药物多浓度处理的项目延长至 7-10 个工作日;高峰期或需重复上机的样本可能延长,以合同为准。
本页内容为一般性介绍,实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准,详情请咨询技术支持。
