维而勤生物

细胞周期

细胞周期检测服务(PI 流式分析)。

细胞周期检测

细胞周期(Cell Cycle)是细胞增殖的核心过程,分为 G0/G1、S、G2/M 几个阶段。通过碘化丙啶(PI)嵌入双链 DNA 后用流式细胞仪检测荧光强度,可基于 DNA 含量(G1 期为 2N,G2/M 期为 4N,S 期介于两者之间)分析各时相细胞比例,是评估细胞增殖状态、药物周期阻断作用、肿瘤生物学特性的重要手段。

维而勤提供 PI 染色流式细胞周期分析服务,配套 70% 乙醇固定、RNase A 消化(去除 RNA 干扰,PI 也能结合 RNA)、PI 染色(50 μg/mL)与 ModFit LT 拟合软件,可精确给出 G0/G1、S、G2/M 各时相比例与增殖指数(PI = (S+G2/M)/(G1+S+G2/M)),并支持血清饥饿、诺考达唑、胸苷双阻断等周期同步化方案。

订购信息

支持 PI 染色流式周期分析与周期同步化方案设计,可设药物干预组。

目录号服务项目检测内容分析指标生产时间
CX801细胞周期检测(单组单样本)PI 染色 + 流式G1/S/G2-M 比例5-7 个工作日
CX802细胞周期检测(多组比较)PI 染色 + 流式各时相比例 + 增殖指数6-8 个工作日
CX803周期同步化方案设计血清饥饿 / 诺考达唑 / 胸苷同步化效率评估咨询
CX804细胞周期 + 凋亡联检PI 周期 + Annexin V/PI周期 + 凋亡双指标咨询
CX805药物周期阻断分析(多浓度)PI 染色 + 流式剂量-效应周期分布7-10 个工作日
价格根据样本量与分组数询价立即询价

交付内容

交付 DNA 含量直方图、各时相比例与增殖指数,支持 ModFit 拟合报告。

交付项目内容说明
DNA 含量直方图PI 荧光强度分布图(流式原始 + ModFit 拟合)
各时相比例G0/G1、S、G2/M 各时相细胞百分比统计表
增殖指数PI = (S+G2/M)/(G1+S+G2/M) 计算结果
拟合报告ModFit LT 拟合报告(含 Goodness of Fit RCS 值)
实验报告PDF 报告(含固定染色流程、上机参数与结论)

以上为参考交付范围,具体交付内容以双方确认的实验方案为准,详情请咨询技术支持。

质控标准

PI 染色流式周期检测全流程质控:

细胞量
方法:细胞计数(固定前)
标准:每样本 ≥ 1×10⁶ cells
固定
方法:70% 预冷乙醇,4℃ 固定 ≥ 2 h
标准:固定充分,可过夜(不超过 2 周)
RNase 消化
方法:RNase A 50 μg/mL,37℃ 30 min
标准:充分消化 RNA,避免 S 期假阳性
PI 染色
方法:PI 50 μg/mL,4℃ 避光 30 min
标准:避光孵育,染色均匀
上机采集
方法:低速采集 ≥ 1×10⁴ cells
标准:CV(变异系数)< 5%
拟合质量
方法:ModFit LT 软件拟合
标准:Goodness of Fit (RCS) 理想 < 5

技术参数

关键参数
PI 50 μg/mL / RNase 50 μg/mL
PI 终浓度 50 μg/mL 结合双链 DNA,RNase A 50 μg/mL 37℃ 30 min 消化 RNA 干扰。每样本上机采集 ≥ 1×10⁴ cells,CV(变异系数)< 5%,ModFit LT 拟合 RCS < 5 时数据可信。
⚠️以下情形可能影响结果
  • 组织样本或贴壁极紧的细胞消化时可能产生团聚或碎裂,影响直方图峰形
  • 样本中混杂亚二倍体峰(sub-G1)可能提示凋亡,需结合凋亡检测判定
  • 细胞倍增过快或同步化不佳会导致 S 期比例不稳定
  • 固定时间过长(> 2 周)导致 PI 染色减弱、CV 升高
  • 客户提供样本固定不当或运输导致细胞降解

客户提供

委托维而勤前请按以下清单准备材料:

  • 提供待测细胞株名称、来源、代次与培养条件
  • 明确药物处理方案:药物名称、浓度、处理时间与检测时间点
  • 明确是否需要周期同步化(血清饥饿 / 诺考达唑 / 胸苷双阻断)
  • 明确分组与重复数(常规 3 复孔/组)
  • 如检测原代细胞或悬浮细胞,需提前沟通固定与染色方案
  • 如客户自备药物,需提供溶解度、溶剂与活性信息
PI 染色必须配合 RNase A 消化,否则 RNA 会与 PI 结合导致 S 期假阳性升高;固定后样本应尽快上机,避免长期储存导致 CV 升高;亚二倍体峰(sub-G1)出现提示凋亡,建议联检 Annexin V/PI。

交付周期

标准交付周期
5-7 个工作日
从确认方案与收到合格细胞次日起算;含周期同步化方案或药物多浓度处理的项目延长至 7-10 个工作日;高峰期或需重复上机的样本可能延长,以合同为准。
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本页内容为一般性介绍,实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准,详情请咨询技术支持。