细胞迁移与侵袭
细胞迁移与侵袭检测服务(Transwell / 划痕实验)。
细胞迁移与侵袭检测
细胞迁移与侵袭是肿瘤转移、伤口愈合、免疫细胞趋化等研究的核心实验。维而勤提供三种互补的检测体系:Transwell 迁移实验(不带 Matrigel)检测细胞在趋化因子梯度下的主动迁移能力;Transwell 侵袭实验(铺 Matrigel 基质胶)模拟基底膜屏障,检测细胞分泌基质金属蛋白酶降解并穿越基质的能力;划痕实验(wound healing)检测细胞群体迁移与伤口愈合能力。三者可互为补充验证。
服务覆盖细胞血清饥饿、Transwell 上室接种(8 μm 孔径聚碳酸酯膜)、Matrigel 铺胶(侵袭实验)、下室趋化剂加入、孵育培养、擦去上室未穿膜细胞、0.1% 结晶紫染色、显微镜 5 个随机视野计数与愈合率计算(划痕实验通过 ImageJ 测量划痕面积变化)。
检测方法对比
Transwell 迁移
8 μm 孔径膜,检测主动迁移
- 原理:上下室以 8 μm 微孔膜分隔,下室趋化剂诱导细胞穿膜迁移
- 不铺 Matrigel,细胞仅需运动能力即可穿膜
- 适合评估肿瘤细胞基础迁移能力、免疫细胞趋化
- 读值:结晶紫染色后 5 视野细胞计数
Transwell 侵袭
Matrigel 基质胶,模拟基底膜屏障
- 原理:膜上铺 Matrigel 基质胶模拟基底膜,细胞需降解基质方可穿膜
- 检测细胞分泌 MMP 等基质金属蛋白酶降解基质的能力
- 侵袭是肿瘤转移的关键步骤,临床相关性更高
- 读值:结晶紫染色后 5 视野细胞计数
划痕实验
Wound healing,群体迁移评估
- 原理:单层贴壁细胞上用枪头划痕制造伤口,定时拍照观察愈合
- 操作简单、经济,适合高通量初筛
- 计算愈合率 =(0 h 划痕面积 − t h 划痕面积)/ 0 h 划痕面积 × 100%
- 注意:受细胞增殖影响,建议加 Mitomycin C 抑增殖
订购信息
支持 Transwell 迁移、Transwell 侵袭(Matrigel)、划痕实验三种体系,可设药物干预组与对照。
| 目录号 | 服务项目 | 检测体系 | 读值方式 | 生产时间 |
|---|---|---|---|---|
| CX701 | Transwell 细胞迁移实验(无 Matrigel) | Transwell 8 μm | 结晶紫 5 视野计数 | 5-8 个工作日 |
| CX702 | Transwell 细胞侵袭实验(含 Matrigel) | Transwell + Matrigel | 结晶紫 5 视野计数 | 6-9 个工作日 |
| CX703 | 划痕实验(Wound healing) | 划痕愈合 | ImageJ 愈合率 | 3-5 个工作日 |
| CX704 | 迁移侵袭套餐(Transwell 迁移 + 侵袭) | Transwell + Matrigel | 双指标对比 | 咨询 |
| CX705 | Transwell 多浓度药物干预(含统计) | Transwell 8 μm | 剂量-效应曲线 | 咨询 |
价格根据细胞类型、分组数与重复数询价立即询价 →
交付内容
交付染色图片、细胞计数统计与愈合率数据,支持发表级图片输出。
| 交付项目 | 内容说明 |
|---|---|
| 染色图片 | 结晶紫染色图(Transwell 每孔 5 个随机视野,200×) |
| 细胞计数 | 5 视野细胞计数统计表(含均值 ± SD 与组间 t 检验) |
| 划痕图片 | 划痕 0 h / t h 同视野对比图(划痕实验) |
| 愈合率 | ImageJ 测量的划痕愈合率与迁移率数据 |
| 实验报告 | PDF 报告(含实验流程、Matrigel 批号、统计与结论) |
以上为参考交付范围,具体交付内容以双方确认的实验方案为准,详情请咨询技术支持。
质控标准
迁移与侵袭实验全流程质控:
✓Transwell 孔径
方法:聚碳酸酯膜 8 μm(肿瘤细胞常规)
标准:可按细胞大小选 5 / 8 / 12 μm
✓Matrigel 铺胶
方法:1:8 稀释铺胶,37℃ 聚合 30 min(侵袭)
标准:胶面均匀无气泡,每孔加胶量一致
✓细胞接种量
方法:上室接种 1×10⁴ - 1×10⁵ cells
标准:血清饥饿处理,下室加 10% FBS 趋化
✓染色计数
方法:0.1% 结晶紫染色 20-30 min,显微镜 200× 计数
标准:每孔随机取 5 个视野计数求均值
✓重复设置
方法:每组 ≥ 3 复孔
标准:提供均值 ± SD 与组间统计学检验
✓划痕标准化
方法:200 μL 枪头划痕 + PBS 洗脱碎屑
标准:建议加 Mitomycin C 抑增殖,纯评估迁移
技术参数
关键参数
8 μm 孔径 / Matrigel 1:8
Transwell 默认 8 μm 聚碳酸酯膜(可按细胞大小调整);Matrigel 基质胶按 1:8 稀释铺胶。每孔 5 个随机视野计数,每组 ≥ 3 复孔。
⚠️以下情形可能影响结果
- •迁移/侵袭能力极弱的细胞(如某些非肿瘤细胞)穿膜细胞数少,结果波动大
- •细胞倍增时间过短,划痕实验结果受增殖干扰(建议加 Mitomycin C)
- •Matrigel 批次差异可能影响侵袭结果,建议同批样本同批胶
- •客户提供的细胞状态不佳(代次过老、污染、活性低)会影响结果
- •趋化因子浓度梯度设置不当可能影响迁移效率
客户提供
委托维而勤前请按以下清单准备材料:
- ✓提供待测细胞株名称、来源、代次、倍增时间与培养条件
- ✓明确实验类型:Transwell 迁移 / Transwell 侵袭 / 划痕实验 / 组合
- ✓明确是否需药物干预:药物名称、浓度梯度、处理方式(上室或下室)
- ✓明确趋化剂方案:FBS 浓度、特定趋化因子(如 SDF-1、EGF)及浓度
- ✓明确接种密度偏好与孵育时间(通常 12-48 h,视细胞迁移能力)
- ✓如客户自备药物/趋化因子,需提供溶解度、储存条件与活性信息
Transwell 上室细胞应血清饥饿(无血清或 0.5% FBS)12-24 h,下室加 10% FBS 或趋化因子形成梯度;侵袭实验 Matrigel 需提前铺胶并聚合,孵育时间通常比迁移实验长 12-24 h。
交付周期
标准交付周期
5-8 个工作日
从确认方案与收到合格细胞次日起算;侵袭实验含 Matrigel 铺胶需延长 1-2 个工作日;迁移能力弱的细胞孵育时间较长(可达 48 h),以合同为准。
本页内容为一般性介绍,实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准,详情请咨询技术支持。
