Western Blot(蛋白免疫印迹)
Western Blot 蛋白免疫印迹检测服务,定性定量分析目的蛋白。
Western Blot 蛋白免疫印迹检测
Western Blot(蛋白免疫印迹,WB)是通过 SDS-PAGE 凝胶电泳分离蛋白样品、转印至固相膜(NC 或 PVDF 膜)后,利用抗原-抗体特异性反应对目标蛋白进行定性或半定量分析的经典分子生物学技术,是基因表达、信号通路、蛋白相互作用等研究中不可或缺的验证手段。
维而勤提供从细胞/组织裂解、蛋白定量、SDS-PAGE 电泳、转膜、封闭、抗体孵育到化学发光成像与分析的一站式 WB 检测服务。支持 8%、10%、12%、15% 不同浓度分离胶以适配不同分子量蛋白,并提供 NC 膜与 PVDF 膜两种转印选择;全流程采用 ECL 化学发光显色,结果稳定可靠。
订购信息
按蛋白条带数或样品数计费,支持单基因与多基因检测组合。
| 目录号 | 服务项目 | 规格 | 上样量 | 交付时间 |
|---|---|---|---|---|
| CW201 | Western Blot 全套检测(细胞样品) | 按样品/基因计 | 20-50 μg 总蛋白/孔 | 10-15 个工作日 |
| CW202 | Western Blot 全套检测(组织样品) | 按样品/基因计 | 20-50 μg 总蛋白/孔 | 12-15 个工作日 |
| CW203 | Western Blot 检测(客户提供蛋白裂解液) | 按样品/基因计 | 20-50 μg 总蛋白/孔 | 7-10 个工作日 |
| CW204 | 抗体预实验(条件摸索) | 按基因计 | 20-50 μg 总蛋白/孔 | 5-7 个工作日 |
| CW205 | 磷酸化蛋白 WB 检测 | 按样品/基因计 | 30-50 μg 总蛋白/孔 | 12-15 个工作日 |
价格根据样品类型、抗体提供方与检测基因数询价立即询价 →
交付内容
每个样品均设置内参对照(β-actin、GAPDH、Tubulin 等),交付完整实验报告与原始图片。
| 交付项目 | 内容说明 |
|---|---|
| 实验报告 | 包含蛋白浓度测定、上样量、抗体信息、曝光条件与灰度分析结果 |
| 化学发光图片 | ECL 显色原始图片(含内参条带与目的条带),提供不同曝光时长 |
| 灰度分析 | 采用 ImageJ 等软件进行灰度值定量分析 |
| 抗体信息 | 一抗 / 二抗货号、稀释比、孵育条件记录 |
| 膜与胶照片 | 可选提供考马斯亮蓝染色或丽春红染色照片 |
以上为参考交付范围,具体交付内容以双方确认的实验方案为准,详情请咨询技术支持。
质控标准
全流程质控确保结果可靠可重复:
✓蛋白定量
方法:BCA 法或 Bradford 法
标准:上样量准确(20-50 μg/孔)
✓内参验证
方法:β-actin / GAPDH / Tubulin 等管家蛋白
标准:内参条带均一、无显著差异
✓分离胶浓度
方法:8% / 10% / 12% / 15% SDS-PAGE(按蛋白分子量选择)
标准:目的蛋白条带清晰分离
✓转膜效率
方法:NC 膜(0.45 μm)或 PVDF 膜(0.22 / 0.45 μm)
标准:蛋白完全转移至膜上
✓分子量核对
方法:预染蛋白 Marker(10-250 kDa)
标准:目的条带分子量与预期一致
样品要求与储存
蛋白样品易降解,请严格按条件保存与运输。
🧊
组织 / 细胞样品
干冰运输 / -80℃保存
组织 ≥ 100 mg,细胞 ≥ 1×10⁶ 个;干冰运输,-80℃ 保存 ≤ 6 个月。
❄️
蛋白裂解液
-20℃ / -80℃
浓度 ≥ 2 μg/μl,体积 ≥ 50 μl;干冰运输,-80℃ 保存 ≤ 3 个月,避免反复冻融。
💧
抗体样品
4℃ / -20℃
一抗建议 -20℃ 保存,二抗 4℃ 保存;运输需加冰袋并标注效价。
客户提供样品
委托本司前请按以下清单准备材料:
- ✓提供目标蛋白信息:蛋白名称、基因 ID、预期分子量
- ✓提供或委托代购一抗与二抗,注明货号、物种反应性与稀释比
- ✓蛋白裂解液需提供浓度(BCA 测定)与样品处理方法说明
- ✓如检测磷酸化蛋白,需特别说明并使用磷酸酶抑制剂
- ✓组织样品需提供取材部位、物种与保存条件
抗体质量是 WB 成功的关键,建议提供经文献验证的抗体或委托本司代购;客户自备抗体的项目不保证一次出图成功。
交付周期
标准交付周期
10-15 个工作日
从收到合格样品与抗体次日起算;抗体预实验、磷酸化检测或高峰期可能延长,以合同为准。
本页内容为一般性介绍,实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准,详情请咨询技术支持。
