克隆形成实验
克隆形成实验服务，评估细胞增殖能力与克隆源性。
克隆形成实验
克隆形成实验（Colony Formation Assay，又称平板克隆形成实验 / Clonogenic Assay）是评估细胞增殖能力、独立成克隆能力与辐射 / 药物对细胞长期增殖毒性影响的关键技术。其原理为：将单细胞悬液以低密度接种于培养皿，每个存活且具增殖能力的细胞经多次分裂形成肉眼可见的细胞集落（克隆），通过染色计数计算克隆形成率（Plating Efficiency, PE）与存活分数（Surviving Fraction, SF），反映细胞的长期增殖潜能与处理后的存活能力。
维而勤提供贴壁细胞平板克隆形成与悬浮 / 转化细胞软琼脂克隆形成两种体系，覆盖细胞接种、培养 10-14 天、结晶紫染色、克隆计数与克隆形成率统计分析全流程，≥ 50 个细胞的克隆判定为有效克隆，可客观评价药物、基因修饰或辐射对细胞克隆源性的影响。
订购信息
按样品数 / 分组计费，支持平板克隆（贴壁细胞）与软琼脂克隆（悬浮 / 转化细胞），可设多个药物浓度与时间点。
| 目录号 | 服务项目 | 克隆类型 | 适用细胞 | 交付时间 |
|---|---|---|---|---|
| CX1301 | 平板克隆形成实验（对照组） | 平板克隆 | 贴壁细胞 | 15-20 个工作日 |
| CX1302 | 平板克隆形成实验（含药物 / 基因处理分组） | 平板克隆 | 贴壁细胞 | 20-25 个工作日 |
| CX1303 | 软琼脂克隆形成实验（锚定非依赖性生长） | 软琼脂克隆 | 悬浮 / 转化细胞 | 咨询 |
| CX1304 | 克隆形成 + 结晶紫染色 + 计数分析套餐 | 平板 / 软琼脂 | 通用 | 咨询 |
| CX1305 | 克隆形成实验（含 GIemsa 染色或拍照） | 平板克隆 | 贴壁细胞 | 15-20 个工作日 |
价格根据细胞类型、分组数与处理方案询价立即询价 →
克隆类型对比
平板克隆形成（贴壁）
评估贴壁细胞增殖与克隆源性
- 单细胞接种于 6 孔板 / 培养皿（100-1000 个/孔），贴壁生长 10-14 天
- 评估细胞增殖能力、药物 / 辐射对克隆源性的长期影响
- 适用于绝大多数肿瘤细胞与贴壁原代细胞
软琼脂克隆形成（悬浮）
评估锚定非依赖性生长与致瘤性
- 细胞悬浮于 0.3% 顶层琼脂，下层 0.6% 底层琼脂，培养 2-4 周
- 检测转化细胞锚定非依赖性生长能力，是体外评估细胞恶性转化与致瘤性的金标准
- 适用于病毒转化细胞、肿瘤干细胞与致瘤性评价
交付内容
交付克隆染色照片、计数数据与克隆形成率统计，确保结果可追溯、可发表。
| 交付项目 | 内容说明 |
|---|---|
| 克隆染色照片 | 结晶紫 / Giemsa 染色后整孔照片（每孔）与代表性克隆特写 |
| 克隆计数 | ≥ 50 个细胞的有效克隆计数（每组 ≥ 3 复孔），含人工 / 软件计数数据 |
| 克隆形成率 | 克隆形成率（PE = 克隆数 / 接种细胞数 × 100%）与存活分数（SF）统计 |
| 分组数据 | 各处理组克隆数对比柱状图与统计分析（含剂量-效应曲线，如适用） |
| 实验报告 | PDF 报告（含接种密度、培养时间、染色方法与结论） |
以上为参考交付范围，具体交付内容以双方确认的实验方案为准，详情请咨询技术支持。
质控标准
克隆形成实验全流程质控确保计数准确、可重复：
✓接种密度
方法：6 孔板 100-1000 个/孔（对照组目标 20-150 克隆/孔）
标准：单细胞分散、克隆独立不融合
✓培养时间
方法：贴壁 10-14 天，软琼脂 2-4 周，定期换液
标准：克隆生长至 ≥ 50 细胞，肉眼可见
✓克隆判定
方法：显微镜或肉眼计数，≥ 50 个细胞计为一个克隆
标准：计数标准统一，避免人为偏差
✓复孔设置
方法：每组 ≥ 3 复孔，必要时平行重复
标准：组内变异小，结果可重复
✓染色计数
方法：0.5% 结晶紫（6% 戊二醛 / 甲醇固定）或 Giemsa 染色
标准：染色均匀，克隆与背景对比清晰
技术参数
关键参数
≥ 50 细胞 / 克隆
克隆判定标准：≥ 50 个细胞的细胞团计为一个有效克隆；接种密度建议对照组目标克隆数 20-150 个/孔（6 孔板），贴壁细胞常规接种 100-1000 个/孔，软琼脂 500-5000 个/孔，具体依细胞增殖能力与处理方案调整。
⚠️以下情形可能影响结果
- •增殖极慢的细胞（某些原代细胞、干细胞）培养 14 天可能克隆仍偏小，需延长培养至 3-4 周
- •细胞易聚集成团（悬浮 / 弱贴壁细胞），单细胞分散困难，可能影响接种均一性
- •药物处理导致细胞严重死亡，对照组克隆数正常但处理组克隆极少或为零
- •客户提供的细胞活性差、代次过老或有支原体污染，克隆形成率显著下降
客户提供
委托维而勤前请按以下清单准备材料：
- ✓提供待测细胞株名称、来源、代次与培养条件（培养基、血清、特殊因子）
- ✓明确克隆类型：贴壁细胞用平板克隆，悬浮 / 转化细胞用软琼脂克隆
- ✓明确处理方案：药物名称、浓度梯度、处理时间，或基因修饰（KO / OE）状态
- ✓如客户自备药物，提供溶解度、溶剂、储存条件与现配或储备液信息
- ✓明确接种密度偏好与复孔数（常规 3 复孔/组），以及检测时间点
- ✓提供预期克隆形成能力参考（如有），便于接种密度优化
接种密度是克隆形成实验的关键：密度过高克隆融合难计数，过低统计误差大；建议预实验摸索细胞增殖能力以确定最佳接种密度。增殖慢或成克隆能力弱的细胞项目，培养周期可能延长，以合同为准。
交付周期
标准交付周期
15-25 个工作日
从确认方案与收到合格细胞/药物次日起算；平板克隆（对照组）15-20 个工作日，含多浓度药物处理分组 20-25 个工作日；软琼脂克隆培养周期长（2-4 周），整体约 30-40 个工作日；增殖慢的细胞项目相应延长，以合同为准。
本页内容为一般性介绍，实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准，详情请咨询技术支持。