铁死亡诱导实验
铁死亡诱导实验服务，研究铁依赖性脂质过氧化细胞死亡。
铁死亡诱导实验
铁死亡（Ferroptosis）是近年发现的一种铁依赖、由脂质过氧化大量积累驱动的程序性细胞死亡方式，在形态、生化与基因层面均不同于凋亡、坏死与焦亡。其核心机制为：抑制胱氨酸 / 谷氨酸逆向转运体（System Xc⁻）导致胞内胱氨酸摄取受阻、谷胱甘肽（GSH）合成减少，或直接抑制谷胱甘肽过氧化物酶 4（GPX4）活性，使脂质修复能力下降，磷脂双分子层发生铁催化的脂质过氧化（Fenton 反应），最终细胞膜破裂死亡。
维而勤提供从铁死亡诱导（Erastin 抑制 System Xc⁻ / RSL3 抑制 GPX4）、表型检测（CCK-8 细胞活力）、机制验证（C11-BODIPY 581/591 脂质过氧化、FerroOrange 亚铁离子、GSH / GPX4 检测）到抑制剂拯救（Ferrostatin-1 / DFO 验证铁死亡特异性）的全流程铁死亡研究服务，可客观验证药物或基因对铁死亡的诱导 / 抑制作用。
订购信息
支持单一诱导剂与多诱导剂组合、机制检测套餐与抑制剂拯救验证，可设多个浓度梯度与时间点。
| 目录号 | 服务项目 | 诱导剂 / 检测 | 验证方式 | 交付时间 |
|---|---|---|---|---|
| CX1401 | 铁死亡诱导 + CCK-8 细胞活力检测 | Erastin / RSL3 | CCK-8 活力 | 7-10 个工作日 |
| CX1402 | 脂质过氧化检测（C11-BODIPY 581/591） | Erastin / RSL3 + C11-BODIPY | 流式 / 荧光显微镜 | 7-10 个工作日 |
| CX1403 | 铁离子检测（FerroOrange） | Erastin / RSL3 + FerroOrange | 荧光显微镜 / 流式 | 7-10 个工作日 |
| CX1404 | 铁死亡抑制剂拯救验证（Ferrostatin-1 / DFO） | 诱导剂 + 抑制剂 | CCK-8 + 脂质过氧化 | 咨询 |
| CX1405 | 铁死亡全流程套餐（诱导 + 表型 + 机制 + 拯救） | Erastin / RSL3 + 全套检测 | CCK-8 + BODIPY + FerroOrange + GSH/GPX4 | 咨询 |
价格根据诱导剂、检测项目与分组数询价立即询价 →
诱导剂与抑制剂
Erastin（System Xc⁻ 抑制剂）
间接抑制 GPX4，需 GSH 耗竭
- 抑制胱氨酸 / 谷氨酸逆向转运体（System Xc⁻），阻断胱氨酸摄取
- 胞内 GSH 合成减少，GPX4 活性间接下降，脂质过氧化累积
- 常用浓度 5-20 μM，起效较慢（通常 24-48 h）
RSL3（GPX4 直接抑制剂）
直接抑制 GPX4，起效快
- 直接共价结合并抑制 GPX4 活性，不依赖 GSH 耗竭
- 诱导效率高、起效快，对许多细胞系比 Erastin 更强效
- 常用浓度 0.1-1 μM，适合快速诱导铁死亡
Ferrostatin-1（铁死亡抑制剂）
脂质自由基清除剂，验证特异性
- 亲脂性自由基捕获抗氧化剂，抑制脂质过氧化链式反应
- 与铁死亡诱导剂联用可显著逆转细胞死亡，验证死亡方式为铁死亡
- 常用浓度 1-10 μM，可与 DFO（铁螯合剂）联用增强拯救效果
交付内容
交付细胞活力、脂质过氧化、铁离子与机制检测数据，配套抑制剂拯救验证，确保铁死亡判定严谨可靠。
| 交付项目 | 内容说明 |
|---|---|
| 细胞活力 | CCK-8 检测各处理组 OD450 与细胞活力（%），含剂量-效应曲线与 IC50 |
| 脂质过氧化 | C11-BODIPY 581/591 流式数据（氧化态绿色荧光增强）或荧光显微镜图片 |
| 铁离子 | FerroOrange 检测胞内游离亚铁离子（Fe²⁺）荧光强度（荧光显微镜 / 流式） |
| GSH / GPX4 | 胞内 GSH 含量测定与 GPX4 蛋白 / 活性检测（可选） |
| 抑制剂拯救 | Ferrostatin-1 / DFO 共处理组与单诱导组对比，逆转率（%）数据 |
| 实验报告 | PDF 报告（含诱导剂浓度、检测方法、统计数据与结论） |
以上为参考交付范围，具体交付内容以双方确认的实验方案为准，详情请咨询技术支持。
质控标准
铁死亡检测全流程质控，确保表型与机制判定严谨：
✓诱导剂浓度
方法：Erastin 5-20 μM / RSL3 0.1-1 μM，设浓度梯度
标准：诱导剂量-效应明确，IC50 可拟合
✓脂质过氧化检测
方法：C11-BODIPY 581/591（5 μM，37℃ 20-30 min），还原态 590 nm / 氧化态 510 nm
标准：诱导组氧化态荧光显著增强，流式 / 显微镜结果一致
✓铁离子检测
方法：FerroOrange（1 μM，37℃ 30 min），橙光通道（Ex 543 / Em 580 nm）
标准：诱导组游离 Fe²⁺ 荧光增强，DFO 螯合后信号下降
✓抑制剂拯救
方法：Ferrostatin-1（1-10 μM）或 DFO（100 μM）共处理
标准：抑制剂显著逆转铁死亡（活力恢复 ≥ 30%）
✓对照设置
方法：未处理对照 + 诱导剂组 + 诱导剂 + 抑制剂组
标准：三组对比验证铁死亡特异性
技术参数
关键参数
Erastin 5-20 μM / RSL3 0.1-1 μM
常用诱导剂浓度范围：Erastin（System Xc⁻ 抑制剂）5-20 μM，RSL3（GPX4 直接抑制剂）0.1-1 μM；具体工作浓度因细胞类型敏感性差异较大，建议设 3-5 个浓度梯度摸索引。铁死亡判定需结合脂质过氧化（C11-BODIPY）、铁离子（FerroOrange）升高与 Ferrostatin-1 拯救逆转三项证据。
⚠️以下情形可能影响结果
- •对铁死亡天然耐药的细胞（如某些 GPX4 高表达或 ferroptosis-suppressor 高表达细胞系），诱导效果可能不明显
- •诱导剂浓度过高或处理时间过长，细胞可能转为凋亡或坏死，需通过抑制剂拯救区分
- •血清浓度、培养基胱氨酸含量影响 System Xc⁻ 通路，需统一培养条件
- •客户提供的细胞活性差、代次过老或有支原体污染，影响诱导与检测
客户提供
委托维而勤前请按以下清单准备材料：
- ✓提供待测细胞株名称、来源、代次与培养条件（培养基、血清浓度）
- ✓明确诱导方案：诱导剂（Erastin / RSL3 / FIN56）、浓度梯度、处理时间与检测时间点
- ✓如客户自备诱导剂或抑制剂，提供溶解度、溶剂（DMSO 等）、储存条件与储备液浓度
- ✓明确检测项目偏好：CCK-8 活力 / C11-BODIPY 脂质过氧化 / FerroOrange 铁离子 / GSH-GPX4 / 抑制剂拯救
- ✓明确是否需抑制剂拯救验证（Ferrostatin-1 / DFO），以判定铁死亡特异性
- ✓提供预期铁死亡敏感性参考（如有），便于浓度梯度设计
铁死亡诱导效果受细胞类型、血清胱氨酸含量与诱导剂浓度显著影响；建议先做 CCK-8 浓度梯度预实验摸索引 IC50，再进行机制检测；部分耐药细胞系可能需更换诱导剂或延长处理时间，以合同为准。
交付周期
标准交付周期
7-15 个工作日
从确认方案与收到合格细胞/诱导剂次日起算；单一检测（CCK-8 / BODIPY / FerroOrange）7-10 个工作日，含抑制剂拯救验证或多浓度梯度 10-15 个工作日；全流程套餐（诱导 + 表型 + 机制 + 拯救）约 15-20 个工作日；需浓度梯度预实验的项目相应延长，以合同为准。
本页内容为一般性介绍，实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准，详情请咨询技术支持。