QPCR（实时荧光定量 PCR）
实时荧光定量 PCR 检测服务，精确量化基因表达水平。
实时荧光定量 PCR（qPCR）检测
实时荧光定量 PCR（Quantitative Real-Time PCR，qPCR）是借助荧光染料或荧光探针，在 PCR 扩增过程中实时收集荧光信号并进行分析的分子生物学技术，具有特异性强、耗时短、灵敏度高等特点，已广泛应用于特定基因的相对表达量检测、基因拷贝数检测、病毒滴度测定及 microRNA 表达分析等领域。
维而勤提供完整的 qPCR 检测服务，覆盖 RNA 提取、cDNA 合成（逆转录）、引物设计与合成、qPCR 扩增及数据分析全流程。检测平台基于 Bio-Rad CFX Connect / ABI QuantStudio 系列荧光定量 PCR 仪，支持 SYBR Green 染料法与 TaqMan 探针法两种主流检测体系，可灵活满足 mRNA、lncRNA、miRNA 等不同类型核酸的定量需求。
订购信息
支持 mRNA / lncRNA / circRNA / miRNA 多种核酸类型检测，可选包含 RNA 提取、逆转录或仅 qPCR 扩增环节。
| 目录号 | 服务项目 | 规格 | 检测方法 | 交付时间 |
|---|---|---|---|---|
| CQ101 | RNA 提取 + 逆转录 + qPCR（全套） | 按样品/基因计 | SYBR Green 法 | 10-15 个工作日 |
| CQ102 | 逆转录 + qPCR（客户提供 RNA） | 按样品/基因计 | SYBR Green 法 | 7-10 个工作日 |
| CQ103 | 仅 qPCR 扩增（客户提供 cDNA） | 按样品/基因计 | SYBR Green 法 | 5-7 个工作日 |
| CQ104 | TaqMan 探针法 qPCR | 按样品/基因计 | TaqMan 探针法 | 15-20 个工作日 |
| CQ105 | microRNA qPCR 检测 | 按样品/基因计 | 茎环引物 + SYBR Green | 12-15 个工作日 |
价格根据样品数、基因数与检测方法询价立即询价 →
交付内容
每个样品每个基因均设置 3 个技术重复，交付完整实验报告与原始数据。
| 交付项目 | 内容说明 |
|---|---|
| 实验报告 | 包含 RNA 浓度与纯度、扩增曲线、熔解曲线、CT 值、相对表达量分析结果 |
| 原始数据 | qPCR 原始荧光数据文件（.pcrds / .eds / .xlsx 等格式） |
| 引物信息 | 引物序列、Tm 值、产物长度 |
| 数据分析 | 采用 2^-ΔΔCt 法计算相对表达量，提供统计图表 |
| 图片交付 | 扩增曲线图、熔解曲线图、柱状统计分析图 |
以上为参考交付范围，具体交付内容以双方确认的实验方案为准，详情请咨询技术支持。
质控标准
符合 MIQE 国际标准的全流程质控：
✓RNA 完整性检测
方法：琼脂糖凝胶电泳（28S:18S ≥ 1.5）或 Agilent Bioanalyzer RIN ≥ 7
标准：RNA 无明显降解
✓RNA 纯度检测
方法：NanoDrop 紫外分光光度法
标准：A260/A280 = 1.8-2.0，A260/A230 ≥ 1.5
✓扩增效率
方法：标准曲线法（5 个浓度梯度，4 倍或 10 倍稀释）
标准：扩增效率 90%-110%
✓线性相关性
方法：标准曲线 R² 值
标准：R² ≥ 0.99
✓特异性验证
方法：熔解曲线（Melt Curve）分析
标准：单一特征峰，无非特异性扩增
✓污染控制
方法：无模板对照（NTC）与 UDG 防污染系统
标准：NTC 无扩增信号
样品要求与储存
样品质量直接影响检测结果，建议干冰运输并避免反复冻融。
🧊
组织 / 细胞样品
干冰运输 / -80℃保存
新鲜组织 ≥ 100 mg，细胞 ≥ 1×10⁶ 个；干冰运输，-80℃ 长期保存 ≤ 6 个月。
❄️
RNA 样品
-20℃ / -80℃
浓度 ≥ 100 ng/μl，体积 ≥ 20 μl；冰袋运输，-80℃ 保存 ≤ 1 年，避免反复冻融。
💧
cDNA 样品
-20℃
客户自备 cDNA 需提供浓度与体积信息；-20℃ 短期保存 ≤ 3 个月。
客户提供样品
委托本司前请按以下清单准备材料：
- ✓提供完整实验方案：样品信息、检测基因列表、内参基因、参考文献（如有）
- ✓RNA 样品需提供浓度、纯度（A260/A280）与体积信息，浓度 ≥ 100 ng/μl
- ✓cDNA 样品需注明逆转录体系与稀释倍数
- ✓如需检测特殊样本（如 FFPE 石蜡切片、微量样品），请提前沟通
- ✓miRNA 检测需特别说明，采用茎环引物法或加尾法
客户提供的样品质量直接影响检测结果，建议委托本司完成 RNA 提取与逆转录环节以保证质量一致性。
交付周期
标准交付周期
5-15 个工作日（视项目复杂度）
从收到合格样品与确认引物方案次日起算；引物需新设计合成、样品数较多或高峰期可能延长，以合同为准。
本页内容为一般性介绍，实际交付物、规格与周期以双方确认的实验方案及合同为准，详情请咨询技术支持。